Determinación semi-cuantitativa de la expresión de proteínas utilizando tinción y análisis de inmunohistoquímica: Un protocolo integrado

La IHQ semi-cuantitativa es un método poderoso para investigar la expresión y localización de proteínas en tejidos. La inmunohistoquímica semi-cuantitativa (IHQ) implica el uso de software como el software gratuito ImageJ Fiji para realizar deconvolución y análisis posterior. Actualmente, no existe un protocolo integrado que incluya un procedimiento detallado de cómo medir o comparar la expresión de proteínas. Las publicaciones que utilizan métodos de semi-cuantificación para cuantificar la expresión de proteínas a menudo no proporcionan suficientes detalles en su sección de métodos, lo que dificulta al lector reproducir sus datos. El protocolo actual, por primera vez, proporciona instrucciones detalladas, paso a paso, sobre cómo realizar un análisis semi-cuantitativo de imágenes de IHQ utilizando el software ImageJ Fiji, de modo que los investigadores puedan seguir este único protocolo para llevar a cabo su investigación. El protocolo utiliza la IHQ semi-cuantitativa del péptido transportador de aniones orgánicos (OATP1B1) como ejemplo y proporciona pasos detallados sobre cómo deconvolucionar imágenes de IHQ teñidas con hematoxilina y 3, 3 - diaminobenzidina (DAB) y cómo cuantificar su expresión usando ImageJ Fiji. El protocolo incluye pasos claros para que el lector pueda aplicar este método a muchas proteínas diferentes. Anticipamos que este método proporcionará una guía práctica al lector y hará que la semi-cuantificación de proteínas sea una tarea más fácil de incluir en las publicaciones.