Avances en Espectrometría de Masa por Intercambio de Hidrógeno/Deuterio y la Búsqueda de Sistemas Biológicos Desafiantes

El intercambio de hidrógeno/deuterio (HDX) en fase de solución acoplado a espectrometría de masa (MS) es una herramienta ampliamente utilizada para el análisis estructural en el ámbito académico y en la industria biofarmacéutica. Al monitorear la intercambiabilidad de los protones amida de la cadena principal, el HDX-MS puede revelar información sobre la estructura y dinámica de orden superior en una proteína, puede rastrear las rutas de plegamiento de proteínas, mapear sitios de interacción y evaluar estados conformacionales de muestras de proteínas. La combinación de la versatilidad de la reacción de intercambio de hidrógeno/deuterio con la sensibilidad de la espectrometría de masa ha permitido el estudio de sistemas proteicos extremadamente desafiantes, algunos de los cuales no pueden ser estudiados adecuadamente utilizando otras técnicas. Las mejoras en las últimas tres décadas han aumentado continuamente el rendimiento, la robustez y han ampliado los límites de lo que es factible para las investigaciones de HDX-MS. Para ofrecer una visión general a los investigadores que buscan utilizar y obtener el máximo provecho del HDX-MS para el análisis estructural de proteínas, resumimos los principios fundamentales, la metodología básica, las fortalezas y debilidades, y las aplicaciones establecidas del HDX-MS mientras destacamos nuevos desarrollos y aplicaciones.