El ARNm es un ligando endógeno para el receptor tipo Toll 3

Los receptores tipo Toll (TLRs) son los receptores de señalización básicos del sistema inmunológico innato. Se activan por moléculas asociadas a patógenos o a células y tejidos del huésped lesionados. Se ha demostrado que el TLR3 responde al ARN de doble cadena (ds), un intermediario de replicación para muchos virus. Aquí presentamos evidencia de que el ARN heterólogo liberado de o asociado con células necróticas o generado por transcripción in vitro también estimula el TLR3 e induce la activación inmune. Para evaluar la activación mediada por ARN del TLR3, se generaron células de riñón embrionario humano 293 que expresan TLR3 de manera estable y contienen un reportero de luciferasa dependiente del factor nuclear kappaB. La exposición de estas células a ARN transcrito in vitro resultó en una inducción dependiente del TLR3 de la actividad de luciferasa y secreción de interleucina-8. El tratamiento con ARNm transcrito in vitro activó el factor nuclear kappaB a través del TLR3 mediante un proceso que fue dependiente de la dosis e involucró fosforilación de tirosina. Además, el ARNm natural o 2'-fluorot reemplazado transcrito in vitro indujo la expresión de TLR3, del factor regulador de interferón-1, del factor de necrosis tumoral-alfa y del ARNm de la quinasa asociada al receptor de interleucina-1-M en células dendríticas humanas (DCs). Las DCs respondieron al tratamiento con ARNm expresando marcadores de activación, y esta maduración fue inhibida por un anticuerpo antagonista específico para el TLR3. El ARN endógeno liberado de o asociado con células necróticas también estimuló las DCs, lo que llevó a la secreción de interferón-alfa, que podría ser abolida por el tratamiento previo de células necróticas con RNasa. Estos resultados demuestran que el ARN, probablemente a través de su estructura secundaria, es un potente activador derivado del huésped del TLR3. Este hallazgo tiene una posible relevancia fisiológica porque el ARN que escapa de tejido dañado o que está contenido dentro de células endocitadas podría servir como un ligando endógeno para el TLR3 que induce o modula de otro modo las respuestas inmunitarias.