MicroRNA-145 modula los niveles de N6-Metiladenosina al dirigirse a la región 3'-No Traducida del ARNm de la proteína de la familia del dominio de unión a N6-Metiladenosina YTH 2

N6-Metiladenosina (m6A) es una modificación prevalente presente en los ARNm de eucariotas superiores. La familia de dominio YTH 2 (YTHDF2), una proteína "lectora" de m6A, puede reconocer los sitios de m6A en el ARNm para mediar la degradación del ARNm. Sin embargo, el mecanismo regulador de YTHDF2 no se comprende bien. Con este fin, investigamos la regulación post-transcripcional de YTHDF2. El análisis bioinformático sugirió que el microRNA miR-145 podría dirigirse a la región 3'-no traducida (3'-UTR) del ARNm de YTHDF2. Los niveles de miR-145 estaban negativamente correlacionados con los de ARNm de YTHDF2 en tejidos de carcinoma hepatocelular (HCC) clínicos, y la tinción inmunohistoquímica reveló que YTHDF2 estaba estrechamente asociado con la malignidad del HCC. Curiosamente, miR-145 disminuyó las actividades de luciferasa de la 3'-UTR del ARNm de YTHDF2. La mutación de los sitios de unión predichos de miR-145 en la 3'-UTR del ARNm de YTHDF2 abolió la disminución de la actividad de luciferasa inducida por miR-145. La sobreexpresión de miR-145 reguló a la baja, de forma dependiente de la dosis, la expresión de YTHDF2 en células de HCC, tanto a nivel de ARNm como de proteína. Por el contrario, la inhibición de miR-145 resultó en la regulación al alza de YTHDF2 en las células. El análisis de dot blot y la tinción de inmunofluorescencia revelaron que la sobreexpresión de miR-145 aumentó fuertemente los niveles de m6A en relación con los de las células de HCC control, y este aumento podría bloquearse por la sobreexpresión de YTHDF2. Además, la inhibición de miR-145 disminuyó fuertemente los niveles de m6A, que se rescataron mediante el tratamiento con un ARN interferente pequeño para la disminución de YTHDF2. Así, concluimos que miR-145 modula los niveles de m6A al dirigirse a la 3'-UTR del ARNm de YTHDF2 en células de HCC.