Análisis cuantitativo paso a paso de las adhesiones focales

Las adhesiones focales (AF) son estructuras adhesivas especializadas que sirven como unidades de comunicación celular entre las células y la matriz extracelular circundante. Las AF están involucradas en la transducción de señales y en la organización del citoesqueleto de actina. Las AF median la adhesión celular, que es un fenómeno crítico en la investigación del cáncer. Dado que las células pueden formar muchas y AF a escala de micrómetros, su análisis cuantitativo requiere enfoques de análisis de imágenes bien optimizados 1-3. Aquí, hemos optimizado el análisis de AF de células de cáncer de mama MDA-MB-231. La optimización se basa en el procesamiento adecuado de imágenes de inmunofluorescencia de vinculina, que es uno de los marcadores de las AF. Todos los pasos de procesamiento de imágenes se llevan a cabo utilizando el software ImageJ, que está disponible de forma gratuita y en el dominio público. Las ventajas de nuestro método son: • Los pasos de análisis se simplifican al combinar diferentes plugins del programa ImageJ. • Las AF se detectan mejor con mínimos falsos negativos debido al procesamiento optimizado de imágenes fluorescentes. • Este enfoque puede aplicarse para cuantificar una variedad de imágenes fluorescentes que comprenden señales focales y/o localizadas dentro de un alto fondo, como las AF, una de las muchas estructuras de señalización complejas en una célula.