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La formación ósea endocondral requiere la acción de células de la línea condrocítica y osteoblástica, que pasan por una diferenciación continua durante este proceso. Para identificar subpoblaciones de condrocitos y osteoblastos en reposo, proliferando y en hipertrofia involucrados en la formación ósea, hemos identificado aquí dos nuevos genes marcadores presentes en la osificación endocondral e intramembranosa. Usando análisis de Northern blot e hibridación in situ en secciones paralelas de embriones murinos y huesos de ratones recién nacidos, comparábamos el patrón de expresión de los genes Itm2a y MMP-13 (colagenasa-3) recientemente clonados con el de genes marcadores establecidos para la formación ósea, como fosfatasa alcalina (ALP), osteocalcina (OC) y colágeno tipo X, durante la osificación endocondral e intramembranosa. Durante el desarrollo embrionario, la expresión de Itm2a y ALP fue detectable a mitad de gestación (11.5 días postcoitum dpc) y aumentó hasta 16.5 dpc. La expresión de MMP-13 y OC comenzó a los 14.5 dpc y 16.5 dpc, respectivamente. Esta expresión temporal se reflejó en la distribución espacial de estos marcadores en la placa de crecimiento de los huesos largos. En áreas que estaban bajo osificación endocondral, se encontró la expresión de Itm2a en condrocitos de las zonas de reposo y proliferación. La expresión de ALP y MMP-13 es mutuamente exclusiva: los transcritos de ALP se encontraron solo en condrocitos hipertróficos positivos para colágeno tipo X de la zona superior. La expresión de MMP-13 estaba restringida a los condrocitos de la zona inferior del cartílago hipertrófico que también expresaban colágeno tipo X. En osteoblastos involucrados en la osificación endocondral e intramembranosa, Itm2a no estaba presente. ALP, MMP-13 y OC se expresaron mutuamente de manera exclusiva en estas células, sugiriendo una expresión secuencial dependiente de la diferenciación de ALP, MMP-13 y OC. La identificación del continuo de expresión secuencial de Itm2a, ALP, MMP-13 y OC ahora nos permitirá establecer una serie de genes marcadores que son altamente adecuados para caracterizar las células óseas durante la diferenciación condrocítica y osteoblástica in vivo.
Tuckermann et al. (Sat,) estudiaron esta cuestión.