pH citoplasmático y Mg2+ libre en linfocitos.

Se han realizado mediciones del pH citoplasmático (pHi) y de la concentración de Mg2+ libre (Mg2+i) en linfocitos de cerdo y ratón. El pHi se midió de cuatro maneras: mediante una técnica de punto nulo de digitonina; mediante la medición directa del pH de los pellets celulares congelados y descongelados; a partir del espectro de resonancia magnética nuclear (RMN) del fosfato inorgánico intracelular; y mediante el uso de un indicador fluorescente de pH recién sintetizado y atrapable intracelularmente. En solución salina fisiológica tamponada con HEPES, con pH 7.4 a 37 grados C, el pHi estaba cerca de 7.0. La adición de niveles fisiológicos de HCO3- y CO2 acidificó temporalmente las células en aproximadamente 0.1 U. Las concentraciones mitogénicas de concanavalina A (Con A) no tuvieron efecto medible sobre el pH en la primera hora. Mg2+i se evaluó de tres maneras: (a) a partir del punto nulo de Mg2+ externo en el que el ionóforo A23187 no produjo movimiento neto de Mg2+ o H+; (b) mediante mediciones de electrodos sensibles a Mg en pellets congelados y descongelados; y (c) a partir del espectro de resonancia magnética nuclear del gamma-fosfato de ATP intracelular. El Mg2+ total en las células era aproximadamente 12 mmol por litro de agua celular. Los datos de RMN indicaron Mg2+i mayor que 0.5 mM. El método del punto nulo dio Mg2+i de aproximadamente 0.9 nM. Las mediciones del electrodo dieron 1.35 mM, que se pensó que era una sobreestimación. La exposición a dosis mitogénicas de Con A durante 1 h no dio ningún cambio detectable en el Mg2+ total o libre.