La activación y diferenciación de células T in vitro son técnicas fundamentales en la investigación inmunológica. Aquí, presentamos un protocolo para la activación potente de células T utilizando células derivadas de médula ósea murina (BMDCs) estimuladas por proteína bactericida/aumentadora de permeabilidad (BPI). Describimos los pasos para preparar sobrenadantes recolectados de BMDCs estimuladas por BPI (SN BPI). Luego, detallamos los procedimientos para la purificación de células T CD4 + (naïve) de bazo murino y ganglios linfáticos periféricos y su activación policlonal consecutiva en presencia de SN BPI. Para detalles completos sobre el uso y la ejecución de este protocolo, consulte a Bülow et al. 1 • Guía para cultivar células derivadas de médula ósea murina (BMDCs) • Instrucciones para estimular BMDCs utilizando proteína bactericida/aumentadora de permeabilidad • Pasos para la aislamiento de células T murinas • Procedimientos para la activación de células T en presencia de sobrenadantes estimuladores de BMDC. Nota del editor: Realizar cualquier protocolo experimental requiere adherirse a las pautas institucionales locales para la seguridad en el laboratorio y la ética. La activación y diferenciación de células T in vitro son técnicas fundamentales en la investigación inmunológica. Aquí, presentamos un protocolo para la activación potente de células T utilizando células derivadas de médula ósea murina (BMDCs) estimuladas por proteína bactericida/aumentadora de permeabilidad (BPI). Describimos los pasos para preparar sobrenadantes recolectados de BMDCs estimuladas por BPI (SN BPI). Luego, detallamos los procedimientos para la purificación de células T CD4 + (naïve) de bazo murino y ganglios linfáticos periféricos y su activación policlonal consecutiva en presencia de SN BPI.
Pfab et al. (Fri,) estudiaron esta cuestión.