Aislamiento y diferenciación de células vasculares estromales a células beige/Brite

Los adipocitos marrones tienen la capacidad de desacoplar la cadena respiratoria en las mitocondrias y disipan la energía química como calor. El desarrollo de adipocitos marrones positivos para UCP1 en tejidos adiposos blancos (llamados células beige o brite) es altamente inducido por una variedad de señales ambientales, como la exposición crónica al frío o por agonistas de PPARγ, por lo tanto, este tipo de células tiene potencial como un objetivo terapéutico para el tratamiento de la obesidad. Aunque la mayoría de las líneas de adipocitos inmortalizados no pueden recapitular el proceso de "morfiación" de grasa blanca en cultivo, los adipocitos primarios aislados de la fracción vascular estromal en el tejido adiposo subcutáneo blanco (WAT) proporcionan un sistema celular confiable para estudiar el control molecular del desarrollo de células beige/brite. Aquí describimos un protocolo para el aislamiento efectivo de preadipocitos primarios y para inducir la diferenciación a células beige/brite en cultivo. El efecto de morfización puede evaluarse por la expresión de marcadores selectivos de grasa marrón como UCP1.