Caracterización y purificación de proteasa alcalina de Bacillus subtilus MS1 novel para aditivos de detergente

Las proteasas son una de las enzimas necesarias que tienen un impacto significativo en la biotecnología. Bacillus subtilus MS1, una cepa bacteriana obtenida de sedimentos de aguas residuales, pudo producir la enzima proteasa en agar de leche desnatada. El aislado fue identificado como Bacillus subtilus MS1 con número de acceso KY621344 basado en pruebas bioquímicas, microbiológicas y secuencias del gen 16S rRNA. Se optimizaron diversas condiciones culturales para alcanzar un rendimiento máximo de producción enzimática de 9.322 U/ml. Basado en los resultados de optimización, se creó un cultivo a gran escala utilizando glucosa como fuente de carbono y peptonas como fuente de nitrógeno a 50°C durante 48 h. La purificación de la proteasa se logró utilizando sulfato de amonio al 60% y Sephadex G-100 con un peso molecular de 30 kDa. La actividad de la proteasa alcanzó un rendimiento máximo de 24.437 U/mg a pH 10 y 50°C, y se mantuvo estable entre pH 6.0-11.0 y 30–80°C. En presencia de fluoruro de fenilmetilo (PMSF) y ion de plata (Ag+1), la actividad de la proteasa fue suprimida. La enzima proteasa purificada logró una mayor eliminación de manchas.