La inhibición con oligómeros antisentido sugiere que IκB-α no forma un bucle autorregulatorio negativo para NF-κB en células mesangiales

Las proteínas IkappaB son importantes en la regulación del grupo de factores de transcripción NF-kappaB/Rel, los cuales son fundamentales en la respuesta inflamatoria. IkappaB-alfa se regula al alza mediante la activación de NF-kappaB y se postula que es parte de un bucle de retroalimentación negativa. Sin embargo, este papel de IkappaB-alfa ha sido desafiado por evidencia reciente que demuestra (1) la activación continua de NF-kappaB en células mesangiales y endoteliales a pesar de la resíntesis de la proteína IkappaB-alfa y (2) que la inhibición de la actividad transactivadora de NF-kappaB por corticosteroides puede disociarse de un aumento en la proteína IkappaB-alfa. Investigamos el papel de IkappaB-alfa en células mesangiales utilizando un oligómero antisentido con fosforotioato dirigido contra el punto de inicio de la traducción de IkappaB-alfa. Si IkappaB-alfa funciona como un inhibidor de retroalimentación negativa en estas células, entonces reducir los niveles de IkappaB-alfa debería llevar a un aumento en la actividad de NF-kappaB. Primero demostramos que la resíntesis de la proteína IkappaB-alfa después de la estimulación podría reducirse específicamente. Luego mostramos que la unión del ADN de NF-kappaB no aumentó con el tratamiento antisentido después de la estimulación. Finalmente, la señalización génica dependiente de NF-kappaB después de la estimulación (determinado a través de un reportero de luciferasa de NF-kappaB y la regulación al alza del ARNm de los genes conocidos sensibles a NF-kappaB MCP-1 e IkappaB-alfa) se redujo en lugar de aumentarse. Estos datos sugieren que IkappaB-alfa no forma un bucle autorregulatorio negativo para NF-kappaB en células mesangiales y puede, de hecho, reducir la actividad de NF-kappaB. Esto puede tener relevancia para terapias dirigidas a la inhibición de la actividad de NF-kappaB en enfermedades de células mesangiales.