Ordenamiento Molecular de la Cascada de Activación de Caspasas Iniciada por la Proteasa Granzyme B de Linfocitos T Citotóxicos/Células Asesinas Naturales (CTL/NK)

La Granzyme B es una proteasa granule de linfocitos T citotóxicos/células asesinas naturales (CTL/NK) que puede activar miembros de la familia de proteasas de cisteína caspasas a través del procesamiento de zimógenos de caspasa. Sin embargo, el orden molecular y la importancia relativa de los eventos de activación de caspasa que ocurren en las células objetivo durante la apoptosis iniciada por Granzyme B no se han establecido. Aquí, hemos examinado la jerarquía de los eventos de activación de caspasa iniciados por Granzyme B utilizando un sistema libre de células donde todas las caspasas están presentes a niveles fisiológicos. Mostramos que Granzyme B inicia una cascada de activación de caspasa en dos niveles que involucra siete caspasas, donde la caspasa-3 es necesaria para el segundo nivel de eventos de activación de caspasa. Utilizando un enfoque de proteómica basado en gel bidimensional, también hemos examinado la escala de las alteraciones iniciadas por Granzyme B en el proteoma en presencia o ausencia de la caspasa efectora-3 o -7. Estos estudios indican que Granzyme B dirige un rango muy restringido de sustratos y orquesta la demolición celular principalmente a través de la activación de la caspasa-3.