Análisis Microscópico Raman de Células Microbianas Individuales

Demostramos la utilidad del microscopio confocal Raman para generar un perfil espectral a partir de una sola célula microbiana y el uso de este enfoque para diferenciar especies bacterianas. En general, los perfiles de diferentes taxones bacterianos compartían picos similares, pero las abundancias relativas de estos componentes variaron entre diferentes especies. El uso de métodos multivariantes permitió posteriormente la discriminación de taxones. Investigaciones adicionales revelaron que los espectros de células individuales podían utilizarse para diferenciar entre fases de crecimiento de una sola especie, pero estas diferencias no oscurecieron la discriminación general entre especies. Finalmente, probamos la eficacia del método como medio para identificar células responsables de la absorción de un sustrato específico. Se cultivó una cepa única en medios que contenían proporciones de (13)C(6) a (12)C(6) glucosa que variaban de forma incremental, y se encontró que la incorporación de (13)C desplazaba picos característicos a números de onda más bajos. Estos hallazgos sugieren que la microscopía Raman tiene un potencial significativo para estudios que requieren determinar la identidad taxonómica y el funcionamiento de células microbianas individuales.