La quinasas de proteínas dependiente de ADN es inactivada por autofosforilación de la subunidad catalítica

La quinasas de proteínas dependiente de ADN (DNA-PK) requiere para su actividad extremos libres u otras discontinuidades en la estructura del ADN de doble cadena. In vitro, DNA-PK fosforila varios factores de transcripción y otras proteínas que se unen al ADN y se piensa que funciona en el reconocimiento o reparación de daños en el ADN y/o en la transcripción. Aquí mostramos que in vitro DNA-PK sufre autofosforilación de las tres subunidades de proteínas (DNA-PKcs, Ku p70 y Ku p80) y que la fosforilación se correlaciona con la inactivación de la actividad de quinasas de serina/treonina de DNA-PK. Significativamente, la actividad se restaura con la adición de DNA-PKcs nativo purificado pero no Ku, sugiriendo que la inactivación se debe a la autofosforilación de DNA-PKcs. Nuestros datos también sugieren que la autofosforilación resulta en la disociación de DNA-PKcs del complejo Ku-DNA. Sugerimos que la autofosforilación es un mecanismo importante para la regulación de la actividad de DNA-PK.