Procesamiento del marcador de reconocimiento fosforilado en enzimas lisosomales. Caracterización y purificación parcial de una alfa-N-acetilglucosaminil fosfodiésterasa microsomal.

Se propuso que los grupos N-acetilglucosamina(1)fosfo(6)mannosa recientemente identificados en enzimas lisosomales son precursores de los marcadores de reconocimiento que terminan con manosa 6-fosfato (Tabas, I., y Kornfeld, S. (1980) J. Biol. Chem. 225, 6633-6639; Hasilik, A., Klein, U., Waheed, A., Strecker, G., y von Figura, K. (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77, 7074-7078). Para estudiar la enzima presunta que elimina N-acetilglucosamina del diéster, se desarrolló un ensayo utilizando un oligosacárido radiactivo que contiene grupos de diéster de la estructura mencionada. Se encontró una alfa-N-acetilglucosaminil fosfodiésterasa que corta este sustrato in vitro en la placenta humana y en el hígado de rata. La enzima fue solubilizada de la fracción microsomal de la placenta humana y purificada más de 800 veces con un rendimiento del 75%. Se distingue de la alfa-N-acetilglucosaminidasa lisosomal por los criterios de reactividad cruzada inmunológica, especificidad del sustrato y estabilidad al calor. La enzima parcialmente purificada corta enlaces fosfodiéster de alfa-N-acetilglucosamina en oligosacáridos de enzimas lisosomales, en enzimas lisosomales y en UDP-N-acetilglucosamina. Proponemos que la alfa-N-acetilglucosaminil fosfodiésterasa microsomal está involucrada en el procesamiento del marcador de reconocimiento fosforilado en las enzimas lisosomales.