Síntesis de ADN de doble cadena complementario a los ARNm de lisozima, ovomucoide y ovalbumina.

Se pueden emplear reacciones secuenciales de transcriptasa reversa, ADN polimerasa y S1 nucleasa para sintetizar ADN de doble cadena que representa ARN mensajero. Utilizando productos de transcriptasa reversa obtenidos de lisozima, ovomucoide y ovalbumina parcialmente purificados de mensajeros del oviducto de gallina, hemos caracterizado la reacción de la ADN polimerasa I de Escherichia coli. Hemos optimizado para un alto rendimiento de cadenas complementarias de longitud completa bajo condiciones que requieren solo una pequeña cantidad de ARNm. Se han investigado los efectos de varios parámetros (tiempo, niveles de enzimas, concentración de sal, cation monovalente y temperatura) sobre la longitud de los productos sintetizados por la ADN polimerasa I. Cada uno tiene una influencia significativa sobre la proporción de productos que son de longitud completa. En nuestras condiciones, las tres reacciones son eficientes en la síntesis de ADN duplex de longitud completa a partir de fracciones de ARNm parcialmente purificadas o de ARN total que contiene poli(A).