Luciferasa alternativa para monitorear células bacterianas en condiciones adversas

RESUMEN La disponibilidad de genes de luciferasa clonados de luciérnagas (luc) y de bacterias (luxAB) ha llevado al uso generalizado de la bioluminiscencia como un reportero para medir la viabilidad celular y la expresión génica. El sistema de bioluminiscencia más comúnmente presente en la naturaleza es el sistema de bioluminiscencia de imidazolopirazina de las profundidades del mar. La coelenterazina es un derivado de imidazolopirazina que, cuando es oxidado por una enzima luciferasa apropiada, produce dióxido de carbono, coelenteramida y luz. La luciferasa del copépodo marino Gaussia princeps (Gluc) ha sido clonada recientemente. Expresamos el gen Gluc en Mycobacterium smegmatis utilizando un vector de transporte y comparamos su rendimiento con el de un reportero luxAB existente. A diferencia de luxAB, la luciferasa Gluc retuvo su salida de luminescencia en la fase estacionaria de crecimiento y mostró una estabilidad mejorada durante la exposición a pH bajo, peróxido de hidrógeno y altas temperaturas. El trabajo presentado aquí demostró la utilidad del reportero bioluminiscente de luciferasa de copépodo como una alternativa a la luciferasa bacteriana, particularmente para monitorear respuestas a estímulos de estrés ambiental.