Movimiento Independiente de las Moléculas de IgD e IgM en la Superficie de Linfocitos Individuales

Resumen Se acepta generalmente que las inmunoglobulinas (Ig) en la membrana de los linfocitos son móviles en el plano de la membrana misma. La reacción de anticuerpos divalentes con las moléculas de Ig, que estaban inicialmente distribuidas de manera difusa, induce el entrecruzamiento y la agregación de las moléculas de Ig. Estos agregados son luego transportados activamente hacia un polo de la célula donde forman los llamados capuchones. Este proceso de capping se inhibe marcadamente en frío y puede ser bloqueado por diferentes medicamentos (1, 2). Utilizamos este fenómeno para investigar las moléculas de Ig de dos clases diferentes (IgM e IgD) en linfocitos individuales. Materiales y Métodos. Se investigaron linfocitos de cordón umbilical de 20 bebés sanos y linfocitos periféricos de 20 adultos para la presencia de Ig unidas a la membrana en inmunofluorescencia. Los linfocitos se obtuvieron mediante centrifugación en gradiente con la técnica de Ficoll Isopaque (3). Las células fueron evaluadas por viabilidad y teñidas en suspensión. La técnica de inmunofluorescencia directa con anticuerpos conjugados de isotiocianato de fluoresceína (FITC)3 e isotiocianato de tetrametilrhodamina (TRITC) (4) se realizó incubando de 1 a 3 × 10^6 linfocitos viables suspendidos en 0.05 ml de solución salina tamponada con fosfato (PBS) con 0.05 ml del conjugado a 0°C, 4°C o 37°C durante 30 min. Las células fueron lavadas dos veces con PBS.