Construcción y caracterización de los vectores híbridos de bacteriófago lambda Charon para clonación de ADN

Se han construido veinte fagos lambda híbridos diseñados especialmente para la clonación molecular y se les ha dado el nombre de fagos Charon. Estos fagos difieren en los rangos de tamaños de fragmentos de ADN que pueden ser insertados, por las selecciones y pantallas que pueden utilizarse para aislar y detectar la incorporación de fragmentos clonados, por la forma en que se puede controlar la transcripción del fragmento clonado, por las diferentes enzimas de restricción que se pueden utilizar para la clonación, por las inmunidades del fago que pueden emplearse para controlar la replicación y la transcripción, y por las características de seguridad biológica que contienen. Se describen los cruces utilizados para producir los vectores y se discute su genealogía. La estructura de cada vector ha sido verificada por pruebas genéticas, por determinaciones de longitud de ADN, por análisis de micrografía electrónica de heterodúplexes de ADN y por electroforesis en gel de digestiones con enzimas de restricción. En el transcurso de estas construcciones, se encontró un nuevo sitio EcoRI en un derivado de lambda Aam32Bam1 que se localiza muy cerca del extremo cohesivo izquierdo de lambda.