Cuantificación de la expresión de HER-2 en células tumorales circulantes mediante ACCEPT

Las células tumorales circulantes (CTCs) aisladas de sangre pueden ser analizadas para la expresión de objetivos de tratamiento. La inmunofluorescencia se utiliza a menudo tanto para la enumeración de CTC como para la determinación de los niveles de expresión de proteínas relacionadas con objetivos de tratamiento. La evaluación precisa y reproducible de dichos niveles de expresión de objetivos de tratamiento es esencial para su uso en la clínica. Para facilitar esto, se desarrolló un programa de análisis de imágenes de código abierto llamado ACCEPT en los programas EU-FP7 CTCTrap y CANCER-ID. Aquí se muestra su aplicación en una cohorte retrospectiva de 132 pacientes con cáncer de mama metastásico de los cuales se procesaron muestras de sangre por CellSearch® y se tiñeron para la expresión de HER-2 como marcador adicional. Las imágenes fueron almacenadas digitalmente y los revisores identificaron un total de 4084 CTCs. La expresión de HER-2 en los CTC fue determinada en las imágenes en miniatura mediante ACCEPT. 150 de estas imágenes fueron seleccionadas y enviadas a seis investigadores independientes para evaluar la expresión de HER-2 con y sin ACCEPT. La tasa de concordancia de los resultados de puntuación de los operadores para HER-2 en CTCs fue del 30% y se podría aumentar utilizando la herramienta ACCEPT hasta el 51%. La evaluación automatizada de la expresión de HER-2 mediante ACCEPT en 4084 CTCs de 132 pacientes mostró que 8 (6.1%) pacientes tenían todos los CTC expresando HER-2, 14 (10.6%) pacientes no tenían CTC expresando HER-2 y 110 (83.3%) pacientes tenían CTCs mostrando niveles de expresión de HER-2 variables. En total, se determinó que 1576 CTCs eran positivos para HER-2. Concluimos que el uso del análisis de imágenes permite una cuantificación más reproducible de los objetivos de tratamiento en CTCs y conduce a enfoques totalmente automatizados y reproducibles.