La cinética de la fosforilación de tirosina por la quinasa del receptor del factor de crecimiento epidérmico purificado de las células A-431.

Se demostró que la quinasa de proteínas asociada con el receptor purificado del factor de crecimiento epidérmico (EGF) de preparaciones de membrana (Mr = 150,000) o vesícula (Mr = 170,000) de las células A-431 cataliza la fosforilación del péptido Leu-Glu-Asp-Ala-Glu-Tyr-Ala-Ala-Arg-Arg-Arg-Gly en el residuo de tirosina. El EGF aumentó la fosforilación del péptido de 3 a 5 veces. El análisis cinético en estado estable de la quinasa purificada de membranas mostró que el mecanismo de reacción era de tipo secuencial, tanto en presencia como en ausencia de EGF. Así, el péptido y el ATP deben unirse a la enzima antes de que se libere cualquier producto. Tanto la neurotensina 8-13 como el quiofina fueron inhibidores pero no sustratos de la quinasa de proteínas. La quiofina fue un inhibidor no competitivo lineal con el ATP como sustrato variable y un inhibidor competitivo lineal con el péptido como sustrato variable. El ADP, un producto de la reacción de la quinasa, fue un inhibidor no competitivo lineal con respecto al ATP y un inhibidor competitivo lineal con respecto al péptido. Basado en estos datos, se puede sugerir que la quinasa de proteínas de tirosina de las células A-431 cataliza una reacción Bi Bi ordenada donde el péptido es el primer sustrato en unirse y el ADP es el último producto en liberarse.