Distribución del tamaño, reconocimiento electrónico y conteo de monocitos de sangre humana

Resumen Durante un estudio sobre la separación de monocitos de sangre humana de linfocitos, se desarrolló un método para reconocer y contar monocitos por medios electrónicos. Se utilizaron dispersión de luz (Cytograf, Bio/Physics) y cambios en la resistencia eléctrica (Channelyzer, Coulter) para medir directamente los leucocitos mononucleares en suspensiones celulares. Ambos métodos revelaron un perfil de distribución del tamaño en el que se podían distinguir dos poblaciones de leucocitos mononucleares. Las células más grandes se eliminaron virtualmente después de la fagocitosis de partículas de hierro. Confirmamos que estas células eran monocitos mediante tres criterios diferentes: la actividad intracelular de la lisozima, el número de fagocitos y el porcentaje de células con núcleos en forma de riñón. Las correlaciones altamente significativas que encontramos mostraron que los monocitos podían ser reconocidos y contados mediante mediciones electrónicas. Para este método, se debían utilizar preparaciones purificadas de leucocitos mononucleares, ya que la presencia de eritrocitos, plaquetas y células polimorfonucleares interfería. El análisis estadístico reveló que la medición electrónica permitía discriminar diferencias en el contenido de monocitos del 4.5%, con una probabilidad del 95%. Se calculó que esta sensibilidad del conteo electrónico de monocitos era aproximadamente tres veces mayor que la sensibilidad de métodos microscópicos. Dado que se pueden medir 100,000 células en pocos segundos, no solo se puede seguir la eficiencia de la preparación, sino también cambios menores en el tamaño de monocitos y linfocitos introducidos durante la isolación.