Múltiples intermediarios en la fusión de membranas inducida por SNARE

Se piensa que la fusión de membranas en células eucariotas es mediada por una familia de proteínas altamente conservadas llamadas SNAREs (receptores de proteínas de anclaje sensibles al factor N-etil maleimida soluble). El v-SNARE asociado a la vesícula se une a sus t-SNAREs en la membrana objetivo para formar una hélice que conecta dos membranas y facilita la fusión. Como lo demuestran hallazgos recientes sobre el estado de hemifusión, identificar los intermediarios de la fusión de membranas puede ayudar a desvelar el mecanismo subyacente de fusión. La observación de la fusión impulsada por SNARE a nivel de liposoma único tiene el potencial de descomponer y caracterizar los intermediarios de fusión de la manera más directa. Aquí, informamos sobre la observación en tiempo real de la dinámica de mezcla de lípidos en un único evento de fusión entre un par de liposomas reconstituidos con SNARE. El ensayo revela múltiples estados intermedios caracterizados por valores discretos de FRET entre fluoróforos unidos a la membrana. La hemifusión, el parpadeo de los poros de fusión y las transiciones cinéticas entre intermediarios, que serían muy difíciles de detectar en ensayos en conjunto, ahora son identificados. La capacidad de monitorear la evolución temporal de los eventos de fusión entre dos proteoliposomas debería ser útil para abordar muchas cuestiones importantes en la fusión de membranas mediada por SNARE.