Purificación de un factor quimiotáctico de monocitos secretado por células vasculares de primates no humanos en cultivo

Se purificó una proteína quimiotáctica para monocitos de sangre periférica (SMC-CF) de potencial importancia en su reclutamiento a la íntima arterial en la aterogénesis, a partir de medio libre de suero acondicionado por células musculares lisas medias aórticas de babuino cultivadas. La purificación de SMC-CF se monitoreó mediante un ensayo de filtro utilizando células mononucleares de sangre periférica humana y se logró mediante separación por lotes en un gel de intercambio catiónico seguido por cromatografía de permeación en gel, cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) de intercambio iónico, y HPLC en fase reversa. La recuperación total fue aproximadamente del 10% de la actividad inicial, produciendo 0.5-1 microgramo de SMC-CF/L de medio acondicionado. En la electroforesis en gel de sodio dodecil sulfato-poliacrilamida, SMC-CF migró como una proteína monomérica con un peso molecular aparente de 14,500. Se observó una relación dosis-dependiente entre la concentración de SMC-CF y la actividad quimiotáctica de monocitos, con actividad biológica máxima y semi-máxima observada aproximadamente a 5 y 0.1 nM, respectivamente. Las células musculares lisas aórticas de babuino cultivadas también expresan los genes para ambas cadenas polipeptídicas A y B del factor de crecimiento derivado de plaquetas, que se ha reportado que es quimiotáctico para monocitos y neutrófilos de sangre Deuel, T. F., Senior, R. M., Huang, J. S., & Griffin, G. L. (1982) J. Clin. Invest. 69, 1046-1049. Los análisis de composición de aminoácidos indican que SMC-CF no se deriva ni de la cadena polipeptídica de este factor de crecimiento ni de ciertas proteínas del tejido conectivo potencialmente quimiotácticas.