El ensayo de reacción en cadena de polimerasa inmune magnética para la detección directa de salmonellas en muestras fecales

La detección directa basada en la reacción en cadena de polimerasa (PCR) con especímenes fecales se ve obstaculizada por compuestos inhibitorios, como la bilirrubina y las sales biliares. Estos compuestos fecales mostraron una inhibición significativa de la PCR a bajas concentraciones (10 a 50 microgramos/ml). Para el análisis directo por PCR, las muestras fecales deben diluirse 500 veces para superar la inhibición. Por lo tanto, se utilizó el ensayo de PCR inmune magnética (MIPA), que combina la separación inmunomagnética utilizando anticuerpos monoclonales específicos y PCR, para detectar directamente salmonellas en heces humanas. Las muestras de heces extraídas inmunomagnéticamente solo necesitaban diluirse 10 veces cuando se añadía 1 microgramo de la proteína T4 gen 32 a la PCR. La sensibilidad obtenida con MIPA fue de 10(5) UFC/ml de heces. Se utilizó un panel de anticuerpos monoclonales específicos para serogrupos de Salmonella A a E para extraer salmonellas de muestras clínicas. La detección de salmonellas por MIPA ocurrió en 11 de 14 muestras de heces almacenadas a 4 grados C durante 2 meses. La detección de salmonellas en muestras fecales por MIPA es un método prometedor y rápido para la detección e identificación.