Regulación de la expresión de interleucina-12 en monocitos humanos: activación selectiva por interferón-gamma de los genes p35 y p40 inducibles por lipopolisacáridos

La interleucina-12 (IL-12) es una citoquina derivada de monocitos/macrófagos que es crítica para las actividades y funciones de los linfocitos T y las células asesinas naturales. En este estudio, examinamos la regulación de la expresión de IL-12 por monocitos humanos en respuesta a lipopolisacáridos bacterianos (LPS). Se mostraron varios aspectos novedosos de la inducción de IL-12 a partir de monocitos. La expresión óptima del ARNm de IL-12 y la bioactividad requerían una activación específica de los monocitos por interferón-gamma (IFN-gamma) antes de la estimulación con LPS. El factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF) proporcionó un estímulo de activación equivalente para el factor de necrosis tumoral (TNF) inducido por LPS y el ARNm de IL-12 p40, pero activó débilmente el mensaje de p35 inducible por LPS y la actividad secretada de IL-12. Aunque el factor estimulante de colonias de macrófagos (M-CSF) es un potente factor de supervivencia para los monocitos, no mostró actividad de activación para la producción de IL-12. Experimentos de curso temporal demostraron la regulación independiente de p40 y p35 por IFN-gamma y LPS. La inducibilidad de p40 requerida por LPS necesitaba solo una breve exposición a IFN-gamma (2 horas), mientras que una exposición prolongada (+/- 24 horas) a IFN-gamma resultó en niveles decrecientes de ARNm de p40. La inducibilidad de p35 (por LPS) requería una exposición más larga a IFN-gamma (8 a 16 horas), y continuó siendo inducible hasta 40 horas después de la activación por IFN-gamma. Ambos ARNm fueron inducidos rápidamente (1 a 2 horas) en monocitos activados por IFN-gamma; el mensaje de p35 alcanzó un plateau a las 2 horas, mientras que p40 continuó acumulándose. Finalmente, tanto p40 como p35 fueron inducidos directamente por LPS en presencia de cicloheximida. Estos resultados indicaron que tanto p40 como p35 son inducibles por LPS en monocitos tras un tratamiento previo con IFN-gamma, y que la expresión regulada de p35 controla el nivel de la proteína activa de IL-12 en monocitos humanos purificados. La selectividad de la activación por IFN-gamma concuerda con un posible papel de IL-12 en la iniciación y la amplificación de respuestas del tipo TH1.