Comparación multicéntrica de diferentes ensayos de PCR en tiempo real para la detección cuantitativa del virus de Epstein-Barr

La cuantificación del virus de Epstein-Barr (EBV) en sangre periférica es importante para el diagnóstico y manejo de enfermedades graves por EBV, incluyendo el trastorno linfoproliferativo postrasplante. Actualmente se utilizan una variedad de métodos basados en PCR; sin embargo, hay poca información sobre su comparabilidad. Este estudio evaluó el rendimiento relativo de diferentes ensayos cuantitativos. Se llevó a cabo un estudio comparativo multicéntrico en ocho sitios utilizando tres paneles que consistían en diluciones seriadas de ADN de EBV cuantificado y extractos de un total de 19 muestras de sangre total. Las muestras fueron distribuidas y analizadas de forma ciega. La instrumentación, las quimias de las sondas, los objetivos de amplificación y otros aspectos relacionados con la prueba variaron considerablemente entre los laboratorios. La curva de calibración de cada laboratorio indicó una fuerte evidencia de una relación logarítmica lineal consistente entre la carga viral y el umbral de ciclo, lo que sugiere que el seguimiento intralaboratorio de un paciente dado podría resultar en tendencias cuantitativas relativas similares entre los sitios de prueba participantes. Hubo una fuerte concordancia entre los laboratorios con respecto a los resultados de pruebas cualitativas; sin embargo, se observó una discordancia cuantitativa marcada. Para la mayoría de las muestras, el rango intercuartílico entre laboratorios de la carga viral reportada (en copias/microl) fue aproximadamente de 0.6 unidades logarítmicas, y para una muestra, el rango general fue de aproximadamente 4.2 unidades logarítmicas. Si bien el seguimiento intralaboratorio de los pacientes puede resultar en resultados similares, estos datos indican la necesidad de tener precaución al intentar comparar resultados clínicos obtenidos en diferentes instituciones y sugieren el valor potencial que se puede obtener mediante una metodología de prueba más estandarizada.