La regulación de la xantina oxidasa del hígado de rata. Involucramiento de grupos tiol en la conversión de la actividad enzimática de deshidrogenasa (tipo D) en oxidasa (tipo O) y purificación de la enzima

La actividad de 'xantina oxidasa' del sobrenadante hepático de rata, la mayor parte de la cual se comporta como una deshidrogenasa dependiente de NAD(+) (tipo D), puede ser rápidamente convertida en una oxidasa (tipo O) por reactivos tiol como el disulfuro de tetraetiltiuram, sulfato de cobre, 5,5'-ditiobis-(ácido 2-nitrobenzoico), N-etilmaleimida y p-hidroximercuribenzoato. El tratamiento con sulfato de cobre, si se prolonga, conduce a la inactivación casi completa de la enzima. El efecto de estos reactivos se previene con ditiotreitol, y en todos los casos, excepto el de N-etilmaleimida, se revierte con el mismo tiol. 2. El ditiotreitol previene y revierte la conversión de la xantina oxidasa de tipo D a tipo O provocada por el almacenamiento del sobrenadante hepático de rata a -20 grados C, la preincubación bajo condiciones anaerobias, el tratamiento con carbón o con éter dietílico, y revierte, pero no previene, la conversión obtenida por la preincubación de la homogeneizado completo del hígado. 3. La conversión de la enzima de tipo D a tipo O se efectúa mediante la preincubación del sobrenadante hepático de rata con la fracción sedimentable del hígado de rata, pero no del hígado de pollo o paloma. La actividad de deshidrogenasa de xantina del sobrenadante hepático de pollo no se convierte en una oxidasa mediante la preincubación con la fracción sedimentable del hígado de rata. 4. La actividad enzimática del sobrenadante hepático de rata se convierte de tipo D en tipo O durante la purificación de la enzima: la enzima purificada puede reconvertirse a tipo D por ditiotreitol. 5. La enzima aparece como una oxidasa en el sobrenadante del corazón, intestino, bazo, páncreas, pulmón y riñón de rata. La enzima de todos los órganos, excepto el intestino, puede convertirse en una deshidrogenasa por ditiotreitol.