El factor de necrosis tumoral α activa una NADH oxidasa basada en p22phox en el músculo liso vascular

Una creciente evidencia experimental sugiere que las células no fagocíticas expresan una potente NADH oxidasa productora de superóxido (O2-.) que podría estar relacionada con la NADPH oxidasa fagocítica. Aquí demostramos que la citocina factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alpha) activa, de manera dependiente del tiempo y de la dosis, una NADH oxidasa productora de O2-. en células cultivadas de músculo liso aórtico de rata. Los experimentos de dosis-respuesta para NADH mostraron un desplazamiento hacia arriba de la curva en las células tratadas con TNF-alpha, lo que sugiere que el TNF-alpha incrementó la cantidad de enzima disponible. Mediante la técnica de transfección antisentido, demostramos además que la identidad molecular de esta oxidasa incluye p22(phox) (la subunidad alfa del citocromo b558 y parte del componente de transferencia de electrones de la NADPH oxidasa fagocítica), la cual clonamos recientemente a partir de una biblioteca de ADNc de células de músculo liso vascular de rata. Además, el tratamiento prolongado con TNF-alpha aumentó la expresión de ARNm de p22phox sin afectar la estabilidad del ARNm de p22phox, y solo cuando la actividad transcripcional estaba intacta. Estos hallazgos identifican a una NADH oxidasa que contiene p22phox como una fuente para la producción de radicales libres inducida por citocinas en células de músculo liso vascular y aclaran algunos de los mecanismos implicados en la regulación de la actividad oxidasa vascular.