Clonación de cDNA de MEV, una proteína mutante que facilita la captación celular de mevalonato, e identificación de la mutación puntual responsable de su ganancia de función

Informamos sobre la clonación de expresión de pMev, un cDNA que facilita la captación celular de mevalonato. pMev fue aislado del clon met-18b-2 de células de ovario de hámster chino (CHO), que fueron seleccionadas para crecer en bajas concentraciones de mevalonato cuando la síntesis está bloqueada por compactina (Faust, J. R., y Krieger, M. (1987) J. Biol. Chem. 262, 1996-2004). pMev codifica una proteína de 494 residuos, Mev, que se predice que tiene 12 regiones de paso de membrana, consistente con un transportador de membrana. Sorprendentemente, los niveles de ARN mensajero y proteína de Mev son similares en las células CHO y met-18b-2. El gen Mev difiere del gen silvestre por un solo cambio de base que sustituye una cisteína por fenilalanina en la décima región de paso de membrana. Las células met-18b-2 son heterocigotas para esta mutación dominante de ganancia de función. La transfacción de un cDNA que codifica pMev, pero no el cDNA silvestre, provocó un aumento marcado en la captación de 3Hmevalonato e incorporación en lípidos celulares en células transfectadas de forma estable y transitoria. La disponibilidad de pMev facilitará estudios sobre la incorporación de 3Hmevalonato en productos traza, incluidos p21ras y otras proteínas preniladas.