El ajuste funcional de los CAR revela un umbral de señalización por encima del cual la potencia antitumoral de las CTL CD8+ se atenúa debido a la AICD dependiente de Fas–FasL celular

El desarrollo de receptores de antígenos quiméricos (CAR) está sesgado hacia la selección de construcciones que desencadenan la mayor magnitud de los outputs funcionales de las células T. Aquí, mostramos que los componentes del espaciador extracelular de los CAR y el dominio de señalización citoplasmático modulan, de manera cooperativa, la magnitud de la activación de las CTL CD8(+) para la citólisis de células tumorales y la secreción de citoquinas. Inesperadamente, las construcciones de CAR que generan la mayor actividad in vitro, ya sea mediante el ajuste de la longitud del espaciador extracelular o mediante la adición de módulos de señalización citoplasmática, exhiben una potencia antitumoral atenuada in vivo, mientras que los CAR ajustados para outputs de señalización moderados median la erradicación tumoral. El activado recursivo de CAR hace que las CTL que expresan CARs hiperactivos sean altamente susceptibles a la muerte celular inducida por activación (AICD) como resultado de la expresión aumentada de FasL. El ajuste de CAR utilizando combinaciones de espaciadores extracelulares y módulos de señalización citoplasmática, que limitan la AICD de las CTL CD8(+), puede ser un parámetro crítico para lograr actividad clínica contra tumores sólidos.