Purificación y algunas propiedades de una enzima hidrolizante de monoacilglicerol del tejido adiposo de rata.

Se ha purificado una enzima hidrolizante de monoacilglicerol 2500 veces del tejido adiposo de rata. El paso clave fue la solubilización de la enzima, presumiblemente como un complejo de enzima-detergente, mediante sonicación con un detergente no iónico de alcohol polioxietileno. La purificación se logró mediante intercambio iónico y cromatografía en gel, y enfoque isoeléctrico, en presencia de detergente. A través de la electroforesis en gel de dodecil sulfato de sodio, la proteína de la enzima fue más del 85 % pura. Este método indicó un peso molecular mínimo de 32,900. La composición preliminar de aminoácidos, excluyendo el triptófano, podría ajustarse mejor a un valor de 31,800. La enzima purificada tenía un pI de 7.2, un radio de Stokes estimado de 39 Å por cromatografía en gel y un pH óptimo de 8.0. La estabilidad de la enzima dependía en gran medida de la presencia de detergente y grupos tioles libres. La enzima era responsable de la principal actividad hidrolizante de monoacilglicerol, pero solo de una pequeña parte de la actividad hidrolizante de p-nitrofenilacetato en extractos crudos de tejido adiposo, y hidrolizó 1(3)- y 2-monooleoylglicerol a tasas iguales. Bajo las condiciones del ensayo utilizado, no catalizó la hidrólisis de trioleoylglicerol emulsionado, dioleoylglicerol micelar o emulsionado, colesterol oleato emulsionado, o lisofosfatidilcolina micelar. Es posible que la enzima pueda ser una hidrolasa específica de monoacilglicerol.