Objetivo de Integración del VIH: Una Vía que Involucra Transportin-3 y la Proteína del Poró Nuclear RanBP2

Pantallas de siRNA a escala genómica han identificado factores de la célula huésped importantes para una infección eficiente por VIH, entre los cuales se encuentran proteínas del poro nuclear como RanBP2/Nup358 y el caryófero Transportin-3/TNPO3. El análisis de los roles de estas proteínas en el ciclo de replicación del VIH sugirió que el tráfico correcto a través del poro podría facilitar el siguiente paso de integración. Aquí presentamos datos sobre el acoplamiento entre estos pasos al demostrar que la depleción de Transportin-3 o RanBP2 alteró el paso terminal en la replicación temprana del VIH, la selección de sitios cromosómicos para la integración. Encontramos que la depleción de Transportin-3 y RanBP2 alteró el objetivo de integración para el VIH. Estas reducciones en la expresión disminuyeron la frecuencia de integración del VIH en regiones densas en genes y cerca de características asociadas a genes, un patrón que difirió de lo reportado para la depleción del cofactor de unión de la integrasa del VIH Psip1/Ledgf/p75. La integración de MLV no se vio afectada por la reducción de Transportin-3. Usando reducciones de siRNA y análisis de selección de objetivos de integración, también implicamos a varias proteínas nucleares adicionales en la selección adecuada del sitio objetivo. Para mapear determinantes virales del objetivo de integración, analizamos un derivado quimérico del VIH que contenía MLV gag, y encontramos que el reemplazo de gag copia fenotípicamente las reducciones de Transportin-3 y RanBP2. Así, nuestros datos apoyan un modelo en el cual la interacción dependiente de Gag con la maquinaria de transporte y del poro nuclear adecuado media el tráfico de complejos de VIH hacia sitios de integración.