Autofosforilación de la quinasa de adhesión focal, ppl25FAK, dirige la unión dependiente de SH2 de pp60src

La fosforilación de quinasa de tirosina de proteínas (PTKs) en residuos de tirosina es un evento regulador crítico que modula la actividad catalítica y desencadena la asociación física de PTKs con proteínas que contienen homología de Src 2 (SH2). La quinasa de adhesión focal unida a integrinas, pp125FAK, exhibe fosforilación dependiente de la matriz extracelular en tirosina y se asocia físicamente con dos PTKs no receptoras, pp60src y pp59fyn, a través de sus dominios SH2. Aquí, identificamos Tyr-397 como el principal sitio de fosforilación de tirosina en pp125FAK tanto in vivo como in vitro. La tirosina 397 se encuentra en la unión de los dominios N-terminal y catalíticos, un sitio novedoso para la autofosforilación de PTK. La mutación de Tyr-397 a un residuo no fosforilable deteriora drásticamente la fosforilación de pp125FAK en tirosina in vivo e in vitro. La mutación de Tyr-397 a Phe también inhibe la formación de complejos estables con pp60src en células que expresan Src y FAK397F, sugiriendo que la autofosforilación de pp125FAK puede regular la asociación de pp125FAK con quinasa de la familia Src in vivo. La identificación de Tyr-397 como un sitio principal para la autofosforilación de FAK proporciona uno de los primeros ejemplos de una proteína celular que contiene un sitio de unión de alta afinidad para un dominio SH2 de quinasa de la familia Src. Este hallazgo tiene implicaciones para los modelos que describen los mecanismos de acción de pp125FAK, la regulación de la familia Src de PTKs y la transducción de señales a través de las integrinas.