Independencia posicional y aditividad de los reemplazos de aminoácidos en la estabilidad de hélices en péptidos monoméricos

El péptido de 17 residuos acetilAEAAAKEAAAKEAAAKAamida, descrito como una unidad de plegamiento autónoma (Marqusee & Baldwin, 1987), se ha utilizado para examinar el efecto de los reemplazos de aminoácidos en la estabilidad de la hélice. Los residuos de alanina en las posiciones 4, 9 y 14 de la secuencia del péptido fueron reemplazados ya sea individualmente o de forma múltiple por residuos de serina o metionina mediante síntesis de péptidos en fase sólida. La dependencia térmica de la transición hélice/coil de cada péptido se observó mediante dicroísmo circular en el ultravioleta lejano. Dentro de la variación experimental, los tres reemplazos individuales exhiben una transición térmica común, y los tres reemplazos dobles exhiben una transición térmica común diferente. Estos resultados sugieren que el reemplazo del residuo de alanina central en el repetido EAAAK ubicado en el N-terminal, en el medio, o en el C-terminal de la hélice del péptido tiene el mismo efecto en la estabilidad de la hélice. La temperatura de fusión de cada transición térmica se estimó asumiendo un gráfico de van't Hoff lineal y un cambio en la elipticidad molar de 33,500 deg cm2 dmol-1. Tal análisis indica que cada reemplazo de un residuo de alanina por un residuo de serina disminuye la temperatura de fusión en 11 +/- 1 grados C y que cada reemplazo de un residuo de alanina por un residuo de metionina disminuye la temperatura de fusión en 6 +/- 1 grados C. Estos resultados sugieren que el efecto de estos reemplazos en la estabilidad de la hélice es aditivo.