Identificación de cepas atenuadas de Yersinia pseudotuberculosis y caracterización de una infección orogástrica en ratones BALB/c en el día 5 postinfección mediante mutagénesis con etiqueta de firma

Yersinia pseudotuberculosis se localiza en el íleon distal, ciego y colon proximal del tracto gastrointestinal tras la infección oral. Utilizando mutagénesis con etiqueta de firma, aislamos 13 mutantes de Y. pseudotuberculosis que no sobrevivieron en el ciego de ratones después de la inoculación orogástrica. Doce de estos mutantes también fueron atenuados para la replicación en el bazo después de la infección intraperitoneal, mientras que una cepa, mutada en el gen que codifica la invasina, replicó tan bien como las bacterias salvajes en el bazo. Varias mutaciones se encontraban en operones que codifican componentes del sistema de secreción tipo III, incluidos componentes involucrados en la translocación de proteínas Yop a las células del huésped. Esto indica que uno o más Yops pueden ser necesarios para la supervivencia en el tracto gastrointestinal. Tres mutantes fueron defectivos en la biosíntesis de antígenos O; estos mutantes también fueron incapaces de invadir células epiteliales tan eficientemente como Y. pseudotuberculosis salvaje. Varias otras mutaciones se encontraban en genes que no se habían asociado previamente con el crecimiento en un huésped, incluidos cls, ksgA y sufl. Además, utilizando cepas de Y. pseudotuberculosis marcadas con etiquetas de firma, contamos el número de clones bacterianos diferentes presentes en el ciego, ganglios linfáticos mesentéricos y bazo 5 días postinfección. Encontramos barreras en el animal huésped que limitan el número de bacterias que logran alcanzar y/o replicarse en los ganglios linfáticos mesentéricos y el bazo después de atravesar la mucosa intestinal.