Entrega eficiente mediada por nanopartículas lipídicas de CRISPR/Cas9 para terapia tumoral

El emergente sistema CRISPR/Cas9 representa una plataforma prometedora para la edición del genoma. Sin embargo, su baja eficiencia de transfección es un problema importante que obstaculiza la aplicación del potencial de edición génica de CRISPR/Cas9. En este trabajo, al evaluar un grupo de más de 56 tipos de agentes, construimos un nuevo sistema de entrega basado en nanopartículas lipídicas catiónicas modificadas con fosfolípidos de polietileno glicol (PLNP) que puede condensar y encapsular un plásmido de Cas9/ARN guía único (sgRNA) (ADN) para formar una estructura de núcleo–cascarón (PLNP/DNA) que mediaba hasta un 47.4% de transfección exitosa de plásmidos Cas9/sgPLK-1 en células A375 in vitro. Una inyección intratumoral de plásmidos Cas9/sgPLK-1 en ratones portadores de tumores de melanoma resultó en una disminución significativa de la proteína quinasa 1 (PLK-1) y supresión del crecimiento tumoral (>67%) in vivo. Este enfoque proporciona un método versátil que podría utilizarse para entregar el sistema CRISPR/Cas9 con alta eficiencia y seguridad tanto in vitro como in vivo. Un material para entregar CRISPR–Cas9 a los núcleos de las células ha sido desarrollado por investigadores en China. CRISPR–Cas9 es un potente sistema de edición genética encontrado en bacterias. Los científicos lo han utilizado recientemente para editar genes en células de mamíferos e incluso en embriones humanos, abriendo la puerta a una serie de tratamientos médicos revolucionarios. Pero el plásmido que codifica CRISPR–Cas9 es un ácido nucleico grande, lo que limita la eficiencia con la que puede entrar en las células objetivo. Ahora, Xingyu Jiang del Centro Nacional para la Nanociencia y Tecnología, Beijing, y sus colegas han demostrado un método versátil para entregar CRISPR–Cas9 de manera eficiente y segura. Después de evaluar más de 56 agentes, construyeron nanopartículas lipídicas catiónicas modificadas con fosfolípidos de polietileno glicol para encapsular CRISPR–Cas9, lo que permitió que las nanopartículas se entregaran a células de melanoma con una eficiencia del 47%. Nuestro trabajo contribuye a sintetizar un vehículo basado en nanopartículas lipídicas, que puede entregar efectivamente ADN de plásmido fusionado a Cas9/sgRNA in vitro y in vivo. Este enfoque mediaba la transfección exitosa de plásmidos Cas9/sgRNA en múltiples líneas celulares in vitro. El vehículo que transportaba Cas9/sgRNA dirigido a PLK-1 resultó en una disminución significativa de la proteína PLK-1 y supresión del crecimiento del melanoma in vivo.