Las Células Madre Mesenquimatosas Inhiben y Estimulan Cultivos Linfocitarios Mixtos y Respuestas Mitogénicas Independientemente del Complejo Mayor de Histocompatibilidad

Nuestro objetivo fue estudiar los efectos de las células madre mesenquimatosas (CMM) sobre la aloreactividad y los efectos de la activación de células T sobre linfocitos periféricos humanos (LPH) in vitro. Las CMM se expandieron a partir de la médula ósea de sujetos sanos. Las CMM aisladas de segundo a tercer paso fueron positivas para CD166, CD105, CD44, CD29, SH-3 y SH-4, pero negativas para CD34 y CD45. Las CMM cultivadas en medios osteogénicos, adipogénicos o condrogénicos se diferenciaron, respectivamente, en osteocitos, adipocitos o condrocitos. La adición de CMM a los cultivos de LPH tuvo varios efectos, que variaron desde una leve inhibición hasta la estimulación de la síntesis de ADN. El índice de estimulación (IE = (LPH + CMM)/LPH) varió entre 0.2 y 7.3. El IE no se vio afectado por la dosis de CMM ni por la adición de CMM alogénicas o autólogas a los linfocitos. Se observó una supresión de la actividad proliferativa en todos los experimentos después de la adición de 10,000-40,000 CMM a los cultivos de linfocitos mixtos (CLMs). La proliferación de linfocitos fue del 10-90%, en comparación con un CLM control realizado en paralelo sin CMM. En contraste, la adición de menos CMM (10-1000 células) llevó a una supresión menos consistente o a una marcada proliferación de linfocitos en varios experimentos, variando del 40 al 190% de la proliferación máxima de linfocitos en los CLM control. La capacidad de inhibir o estimular las respuestas aloreactivas de células T parecía ser independiente del complejo mayor de histocompatibilidad, ya que los resultados fueron similares utilizando CMM de 'terceros' o CMM que eran autólogas para el respondedor o los LPH estimulantes. El efecto inhibidor más fuerte se observó si se añadían CMM al inicio del cultivo de 6 días, y el efecto disminuyó si se añadían CMM en el día 3 o 5. También se notaron efectos inhibitorios marcados de CMM alogénicas y autólogas (15,000) después de la estimulación mitogénica de linfocitos por fitohemaglutinina (proliferación mediana de linfocitos del 30% de los controles), Concanavalina A (56%) y proteína A (65%). Se observó poca, si acaso, inhibición después de la estimulación con mitógeno de pokeweed. Números bajos de CMM (150 células) no pudieron inhibir las respuestas T inducidas por mitógeno. Las CMM tienen efectos moduladores inmunes significativos en los CLMs y después de la estimulación mitogénica de LPH. Altos números de CMM suprimen las células T aloreactivas, mientras que números muy bajos claramente estimularon la proliferación de linfocitos en algunos experimentos. El efecto de un mayor número de CMM sobre los CLMs parece depender más de la dosis celular que de la histocompatibilidad y podría resultar de una 'sobrecarga' de un mecanismo estimulador.