Identificación de una enzima linfocitaria que cataliza el ensamblaje de la inmunoglobulina M pentamérica.

Se aisló una proteína con actividad polimerizante de inmunoglobulina M a partir de la fracción de membrana de células de plasmacitoma de ratón secretoras de IgM pentamérica. El aislamiento se logró aprovechando la solubilidad de la proteína en sulfato de amonio al 50%, su carga neta negativa relativamente alta y su sedimentación a 4.2 S. Los análisis de las preparaciones purificadas mostraron que la proteína polimerizante cataliza el ensamblaje de IgM pentamérica in vitro; se observó que menos de 1 mol de enzima/10 mol de IgM monomérica y 2 ml de cadena J promovían una polimerización del 50%. La evidencia de que la enzima también desempeña un papel esencial en el proceso de ensamblaje in vivo se obtuvo a partir de las velocidades de reacción de la polimerización catalizada in vitro, la similitud entre las moléculas de IgM pentamérica sintetizadas in vitro e in vivo, y el hallazgo de que la enzima polimerizante es un producto específico de los linfocitos B. Los análisis del mecanismo de polimerización sugirieron que la enzima polimerizante es una sulfhidrilo oxidasa; se encontró que se inactivaba mediante agentes quelantes y que se asemejaba al Cu2+ en la catálisis de la formación de enlaces disulfuro intersubunitarios de la IgM. Estos resultados plantean la posibilidad de que el ensamblaje de la IgM pentamérica no implique un intercambio de disulfuro como se pensaba anteriormente, sino que proceda mediante la oxidación directa de los sulfhidrilos de la IgM monomérica y de la cadena J.