Activación oncogénica de la tirosina proteína quinasa p59fyn por mutación de su sitio carboxilo-terminal de fosforilación de tirosina, tirosina 528.

Como resultado de la empalme alternativo, la tirosina proteína quinasa p59fyn relacionada con Src consta de dos isoformas distintas denominadas FynB y FynT. Mientras que el primer producto se acumula principalmente en el cerebro, el segundo se expresa en células hemopoyéticas, especialmente en linfocitos T. Hay evidencia creciente de que las proteínas Fyn son críticas para las funciones normales de las células neuronales y linfoides. Para comprender mejor la regulación de la función catalítica de p59fyn, hemos probado los efectos de mutar el sitio principal de fosforilación de tirosina in vivo, tirosina 528, sobre las propiedades biológicas y bioquímicas de esta enzima. Nuestros estudios mostraron que una mutación de tirosina 528-->fenilalanina (Y528F) convirtió cualquiera de las isoformas de Fyn en una oncoproteína dominante, capaz de transformar completamente fibroblastos de roedores. Sin embargo, aunque tanto Y528F p59fynT como Y528F p59fynB pudieron transformar células NIH 3T3, las moléculas FynT activadas fueron consistentemente más eficientes en este proceso. También se encontró que la expresión de p59fyn tipo salvaje o moléculas de Fyn defectuosas en quinasa Y528F no provocó la transformación de células NIH 3T3, lo que implica que las capacidades transformadoras de Y528F Fyn dependían de una actividad catalítica desregulada. Contrariamente a un estudio anterior (Cheng, S. H., Espino, P. C., Marshall, J., Harvey, R., Merrill, J., y Smith, A. E. (1991) J. Virol. 65, 170-179), estos hallazgos mostraron que la mutación del residuo de tirosina carboxilo-terminal conservado estimuló marcadamente la función catalítica de p59fyn in vivo, lo que implica que la desfosforilación de tirosina 528 es suficiente para producir una activación biológicamente relevante de la quinasa Fyn. Además, nuestros resultados proporcionaron más indicios de que las dos isoformas de Fyn poseen actividades bioquímicas distintas que pueden dictar diferencias funcionales en la fisiología celular normal.