Exposición de plasminógeno y un nuevo receptor de plasminógeno, Plg-RKT, en plaquetas humanas y murinas activadas

Las tasas de activación del plasminógeno se ven mejoradas por la unión a la superficie celular. Anteriormente demostramos que el plasminógeno exógeno se une a las plaquetas que Exponen fosfatidilserina y están extendidas. Las plaquetas contienen plasminógeno en sus α-gránulos, pero la secreción de plasminógeno por las plaquetas no ha sido estudiada. Recientemente, se ha descrito un nuevo receptor de plasminógeno dependiente de lisina, Plg-RKT, en macrófagos. Aquí, analizamos el pool de plasminógeno en las plaquetas y examinamos si las plaquetas expresan Plg-RKT. El contenido de plasminógeno del sobrenadante de plaquetas en reposo y estimuladas por colágeno/trombina fue similar. El tratamiento previo con el análogo de lisina, ácido ε-aminocaproico, aumentó significativamente el plasminógeno derivado de plaquetas (0.33 vs 0.08 nmol/108 plaquetas) en el sobrenadante estimulado, indicando un mecanismo dependiente de lisina para la retención en la membrana. La retención de plasminógeno derivado de plaquetas, dependiente de lisina, sobre plaquetas humanas activadas por trombina y convulxina fue confirmada por citometría de flujo. Las plaquetas iniciaron la actividad fibrinolítica en coágulos deficientes en plasminógeno marcados con fluorescencia y en ensayos de lisis de coágulos turbidimétricos. Se detectó una banda de 17-kDa, consistente con Plg-RKT, en la fracción de membrana de plaquetas mediante western blotting. La microscopía confocal de plaquetas estimuladas mostró que Plg-RKT se colocalizaba con plasminógeno derivado de plaquetas en la membrana de plaquetas activadas. La exposición de plasminógeno se atenuó significativamente en plaquetas estimuladas por trombina y convulxina de ratones Plg-RKT-/- en comparación con ratones Plg-RKT+/+ de la misma camada. La exposición de Plg-RKT en la membrana no dependía de plasminógeno, ya que se detectaron niveles similares del receptor en plaquetas plasminógeno-/-. Estos datos destacan a Plg-RKT como un nuevo receptor de plasminógeno en plaquetas humanas y murinas. Mostramos por primera vez que el plasminógeno derivado de plaquetas se retiene en la membrana de plaquetas activadas y promueve la fibrinólisis local al mejorar la activación del plasminógeno mediada por la superficie celular.