Mecanismos regulatorios para la inducción de la síntesis de enzimas de reparación en respuesta a agentes alquilantes: la proteína ada actúa como regulador transcripcional.

La expresión de los genes ada y alkA, ambos involucrados en la respuesta adaptativa de Escherichia coli a agentes alquilantes, es controlada positivamente por la proteína Ada, el producto del gen ada. Se formaron grandes cantidades de ARN específico de ada y alkA en células tratadas con un agente metilante, mientras que se produjo poco de ese ARN en células no tratadas. Los sitios de inicio de transcripción en vivo para los dos genes se determinaron mediante síntesis de cDNA por extensión de cebadores. En un sistema reconstituido in vitro, se formaron transcritos de ada y alkA de manera dependiente de la proteína Ada. Sin embargo, las respuestas de las dos reacciones de transcripción a los agentes metilantes diferían; la transcripción de ada fue estimulada por metilnitrosourea, mientras que la transcripción de alkA fue suprimida. Preparé una forma metilada de la proteína Ada mediante una reacción in vitro y comparé la actividad con la de la forma normal, no metilada. La forma metilada fue más efectiva en promover la transcripción de ada que la forma no metilada, pero los efectos de ambas formas fueron muy similares con respecto a la transcripción de alkA. Basado en estos hallazgos, proponemos un modelo para el mecanismo molecular de la respuesta adaptativa.