Uso de anticuerpos específicos para cuantificar la proteína de unión a nucleótidos de guanina Go en el cerebro.

Inmunizamos conejos con proteínas purificadas de unión a nucleótidos de guanina (proteínas G) de cerebro bovino y obtuvimos un suero antiséptico, RV3, que reacciona específicamente con la subunidad alfa (39 kDa) de una proteína G de función desconocida, denominada Go, así como con la subunidad beta (35 kDa) común a todas las proteínas G. RV3 no mostró reactividad cruzada con las subunidades alfa de las proteínas G estimuladoras (Gs) o inhibitorias (Gi) asociadas con la adenilato ciclasa, ni con la de la proteína G del segmento externo del bastón, transducina. Los inmunoblot de suero crudo y purificado por afinidad mostraron que RV3 reconoce específicamente la subunidad alfa de Go y la subunidad beta en membranas cerebrales crudas. Usando RV3, encontramos cantidades aproximadamente iguales de Go en membranas cerebrales de rana, pollo, rata, vaca y hombre. La inmunoblotting cuantitativa dio razones de subunidad alfa de Go/subunidad beta aproximadamente iguales a 1 en la corteza cerebral, lo que plantea la posibilidad de que la subunidad alfa de Go libre (no asociada con la subunidad beta) pueda existir en el cerebro. La concentración de la subunidad alfa de Go en la corteza es aproximadamente 5 veces mayor que la de la subunidad alfa de Gi. Los resultados muestran que Go es una proteína inmunoquímicamente distinta, altamente conservada, distribuida por todo el cerebro, con concentraciones particularmente altas en el prosencéfalo.