Factor de acoplamiento de cloroplasto 1: dependencia del tiempo de correlación rotacional en la composición de polipéptidos

Se realizaron mediciones de de polarización de fluorescencia resolvidas en el tiempo en el factor de acoplamiento de cloroplasto 1 (CF1) etiquetado con pirenilmaleimida. Se determinaron los tiempos de correlación rotacional para el CF1 nativo, para el CF1 que carece de los polipéptidos épsilon y/o delta, y para la enzima activada. El tiempo de correlación rotacional medido es característico de la rotación de toda la enzima. La eliminación del polipéptido delta resultó en un tiempo de correlación rotacional un 25% menor, aunque el polipéptido delta contribuye con menos del 5% de la masa de CF1. La eliminación del polipéptido épsilon no tuvo efecto. La eliminación simultánea de los polipéptidos delta y épsilon produjo un tiempo de correlación rotacional un 30% menor. La activación de la ATPasa de CF1 por incubación con ditiotreitol redujo el tiempo de correlación rotacional en un 15% en relación con el de la enzima latente. El tiempo de correlación rotacional de CF1 sin los polipéptidos delta y épsilon es esencialmente el que se espera para una molécula esférica, mientras que las otras formas de la enzima pueden aproximarse a elipsoides de revolución; el cociente axial de la enzima latente se estima a partir del tiempo de correlación rotacional y la viscosidad intrínseca. Estos datos indican que el polipéptido delta altera significativamente la forma de la enzima y que un cambio conformacional acompaña la activación de la enzima por ditiotreitol.