Electroinyección de partículas coloidales y biopolímeros en liposomas unilamelares individuales y células para aplicaciones bioanalíticas

Se desarrolló un método combinado de electroporación y microinyección impulsada por presión para la carga eficiente de biopolímeros y partículas coloidales en liposomas unilamelares del tamaño de una célula individual. Se posicionaron liposomas individuales entre una micropipeta de vidrio llena de soluto con un diámetro de punta de aproximadamente 2-microm, equipada con un electrodo de Pt, y un electrodo de fibra de carbono de 5-microm de diámetro. Se aplicó un pulso transitorio de voltaje de CC de forma de onda rectangular de 1-10 ms (10-40 V/cm) entre los electrodos, enfocando así el campo eléctrico sobre el liposoma. La ruptura dieléctrica de la membrana inducida por el pulso de voltaje aplicado provocó que la punta de la micropipeta ingresara al liposoma y se pudiera inyectar un volumen pequeño (típicamente 50-500 x 10(-15) L) de fluoresceína, ADN de fago T7 intercalado con YOYO, liposomas unilamelares de 100-nm de diámetro o esferas de látex fluorescentes en el compartimento intraliposomal. También demostramos el inicio de una reacción química de intercalación entre el ADN del fago T2 y YOYO-1 mediante inyección dual en un único liposoma unilamelar gigante. El método también se aplicó con éxito para la carga de células individuales cultivadas.