Deleción clonal in vivo e in vitro de timocitos dobles positivos.

Para estudiar los procesos de desarrollo tímico, hemos establecido ratones transgénicos que expresan un receptor de antígeno de células T (TCR) alfa/beta específico para citocromo c asociado con moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase II. Las cadenas de TCR transgénicos se expresan en la mayoría de los timocitos en estos ratones, y se ha demostrado que estas células maduran eficientemente en asociación con las moléculas de MHC de clase II codificadas por Ek- y Ab-. Este informe describe una caracterización de la selección negativa de estos timocitos transgénicos in vivo que está asociada con la expresión de moléculas As. La selección negativa por moléculas As parece resultar en la eliminación de una etapa tardía de timocitos dobles positivos CD4/CD8, ya que hay una ausencia virtual de timocitos CD4 de un solo positivo que llevan TCR transgénicos. Este fenotipo se acompaña de la aparición de timocitos CD4/CD8 dobles negativos y células T periféricas que son funcionalmente reactivas a antígenos. El proceso de selección negativa también se ha investigado utilizando un sistema de cultivo in vitro. Al presentar citocromo c por células presentadoras de antígeno no tímicas que expresan Eb, ocurre una eliminación dependiente de la dosis de antígeno de la mayoría de los timocitos dobles positivos CD4/CD8. En contraste, la presentación de la enterotoxina A de Staphylococcus por Eb in vitro resulta en una eliminación mínima de los timocitos dobles positivos. Además, utilizamos este modelo in vitro para examinar los efectos de la ciclosporina A sobre la selección negativa. A diferencia de sus efectos en células T maduras y los hallazgos de otros in vivo, la ciclosporina A no inhibe la eliminación inducida por antígeno de los timocitos dobles positivos. Finalmente, una comparación de las respuestas a la dosis de antígeno para la eliminación de timocitos y para la activación de células T periféricas indica que el reconocimiento de timocitos dobles positivos es más sensible que las células T maduras al reconocimiento de antígenos.