Identificación rápida de micobacterias a nivel de especie mediante reacción en cadena de la polimerasa y análisis de enzimas de restricción

Se desarrolló un método para la identificación rápida de micobacterias a nivel de especie basado en la evaluación mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) del gen que codifica para la proteína de 65 kDa. El método implica el análisis de enzimas de restricción de los productos de PCR obtenidos con iniciadores comunes a todas las micobacterias. Utilizando dos enzimas de restricción, BstEII y HaeIII, se diferenciaron aislamientos médicos relevantes y otros aislados de laboratorio frecuentes a nivel de especie o subespecie mediante el análisis de patrones de PCR-y-enzyme de restricción. El análisis de patrones de PCR-y-enzyme de restricción se realizó en aislados (n = 330) de medios de cultivo sólidos y líquidos, incluyendo BACTEC, o de stocks congelados y liofilizados. El procedimiento no incluye pasos de hibridación ni el uso de radiactividad y puede completarse en 1 día hábil.