Identificación de la proteína IT del citoesqueleto intestinal como un nuevo tipo de citoqueratina tipo I con propiedades y patrones de expresión inusuales.

Un polipéptido citoesquelético principal (Mr aproximadamente 46,000; proteína IT) del epitelio intestinal humano fue caracterizado mediante métodos bioquímicos e inmunológicos. El polipéptido, que fue identificado como un producto específico y genuino de ARNm por traducción in vitro, reaccionó, en inmunoblot tras SDS-PAGE, solo con uno de los numerosos antisueros de citoqueratina (CK) probados, pero con ninguno de los muchos anticuerpos monoclonales de CK. In vitro, formó complejos heterotípicos con la CK tipo II 8, como se mostró en ensayos de unión por blot y electroforesis en gel en 4 M de urea, y estos complejos se ensamblaron en filamentos intermedios (IFs) bajo condiciones apropiadas. Un fragmento central resistente a la quimotripsina de Mr aproximadamente 38,000 de la proteína IT podría ser obtenido de los IFs citoesqueléticos, indicando su inclusión en un diseño de hélice enrollada. Anticuerpos generados contra la proteína IT decoraron arreglos típicos de fibrillas de CK en células intestinales normales y transformadas. Cuatro fragmentos peptídicos proteolíticos obtenidos del polipéptido IT purificado exhibieron una homología significativa en la secuencia de aminoácidos con regiones correspondientes de las hélices I y II del dominio de varilla de varias otras CK tipo I. Inmunocitoquímicamente, la proteína fue detectada específicamente como un componente prominente del epitelio intestinal y foveolar gástrico, células de sombrilla uroteliales y células de Merkel de la epidermis. Se notaron escasas células epiteliales positivas en el timo, bronquios, vesícula biliar y glándula prostática. La expresión de la proteína IT se mantuvo generalmente en carcinomas colorrectales primarios y metastásicos, así como en cultivos celulares derivados de estos. Se encontró una proteína correspondiente en varias otras especies de mamíferos. Concluimos que el polipéptido IT es un componente integral de IF que está relacionado, aunque de manera algo distante, con las CK tipo I, y, por lo tanto, proponemos agregarlo al catálogo de CK humano como CK 20.