Un modelo mejorado de ratón knock-in Q175 de la enfermedad de Huntington con niveles más altos de huntingtina mutante y fenotipos de enfermedad acelerados

Los ratones modelo de enfermedad de Huntington (HD) con heterocigosis knock-in (KI) de un tramo CAG expandido en el exón 1 del gen homologador de la huntingtina (Htt) del ratón recapitulan genéticamente la mutación que causa la HD, y podrían ser preferidos para estudios preclínicos. Sin embargo, históricamente, estos ratones no han logrado recapitular fenotípicamente la enfermedad humana. Por lo tanto, se han utilizado ratones KI homocigotos, que carecen de Htt salvaje y son mucho menos relevantes para la HD humana. El modelo zQ175 fue el primer ratón KI en exhibir fenotipos significativos similares a la HD cuando es heterocigoto. En un esfuerzo por exacerbar los fenotipos similares a la HD y mejorar la utilidad preclínica, hemos retrocruzado ratones zQ175 con FVB/N, una cepa altamente susceptible a la neurodegeneración. Estos ratones Q175F muestran fenotipos significativos similares a la HD junto con muertes tempranas repentinas por convulsiones fatales. El alelo KI zQ175 retiene un cassette de resistencia a la neomicina floxed aguas arriba del locus del gen Htt y produce niveles drásticamente reducidos de Htt mutante en comparación con el alelo Htt salvaje endógeno. Al entrecruzar con ratones que expresan cre en células de la línea germinal, hemos eliminado el cassette neo de los ratones Q175F generando una nueva línea, Q175FΔneo (Q175FDN). La eliminación del cassette neo resultó en un aumento de aproximadamente 2 veces en Htt mutante y el rescate de convulsiones fatales, lo que indica que el fenotipo de muerte temprana de los ratones Q175F es causado por deficiencia de Htt en lugar de por Htt mutante. Además, los ratones Q175FDN presentan un inicio más temprano y una mayor variedad y gravedad de fenotipos similares a la HD que los ratones Q175F o cualquier modelo de ratón KI HD reportado previamente, haciéndolos valiosos para estudios preclínicos.