La acumulación de ARNm del retrovirus aviar empalmado se inhibe en fibroblastos de embrión de pollo privados de S-adenosilmetionina

La síntesis y procesamiento del ARN del virus de sarcoma aviar B77 en fibroblastos de embrión de pollo infectados se siguió en presencia y ausencia de cicloleucina, un inhibidor competitivo de la síntesis de S-adenosilmetionina y, por lo tanto, un inhibidor de las metilaciones del ARN. Se obtuvo un aumento en los niveles en estado estable de ARN de longitud genómica y una disminución en los niveles en estado estable de moléculas de ARN subgenómico en las células infectadas por el virus de sarcoma aviar privadas de S-adenosilmetionina después de 24 h de tratamiento con el inhibidor. Sin embargo, el número total de moléculas de ARN específico del virus por célula permaneció relativamente constante en ambas condiciones. La producción de ARN específico del virus recién sintetizado en células tratadas y no tratadas con cicloleucina infectadas con una cepa defectuosa de transformación del virus de sarcoma aviar B77 se siguió como función del tiempo de etiquetado con (3)Huridina. La acumulación de ARN de longitud genómica radiactiva de 8.4-kilobases (kb) continuó en las células tratadas con cicloleucina, y la producción de partículas virales procedió a tasas normales, como se mostró anteriormente por la incorporación de precursores nucleosídicos marcados o aminoácidos. En contraste, el ARNm subgenómico recién sintetizado de 3.5-kb, el ARNm putativo para el precursor de la proteína de envoltura, no logró acumularse en las células tratadas. La magnitud de la inhibición en la aparición del ARN radiactivo de 3.5-kb se correlacionó con el alcance de la inhibición de las metilaciones del ARN genómico viral y celular y fue función de la concentración de cicloleucina. En condiciones en las que la acumulación de ARNm de proteína de envoltura de 3.5-kb fue bloqueada por el tratamiento con cicloleucina, se observaron incrementos significativos en la tasa de síntesis de los productos polipeptídicos del ARN de longitud genómica, los precursores de las proteínas gag no glicosiladas (Pr76(gag)) y la transcriptasa reversa (Pr 180(gag pol)) en relación con la tasa de síntesis del precursor de la proteína de envoltura (gPr 92(env)). Estos resultados sugieren que hay un requisito de S-adenosilmetionina para el empalme, pero no para la síntesis, empaquetamiento o función mensajera, del ARN de longitud genómica del retrovirus aviar. Se discuten posibles razones para este requisito.